苯丙氨酸解氨酶活性检测试剂盒(货号:AKAM)
苯丙氨酸解氨酶(PAL)是植物体内苯丙烷类代谢途径的关键酶和限速酶,与木质素、类黄酮、类植保素、生物碱、苯甲酸酯糖苷等次生代谢物的合成密切相关,在植物正常生长发育、抗病、抗逆反应中起着重要作用。
苯丙氨酸解氨酶可催化L-苯丙氨酸裂解为反式肉桂酸和氨,反式肉桂酸在nm处具有特征吸收峰,通过吸光值的变化速率即可表征苯丙氨酸解氨酶的活性。
苯丙氨酸解氨酶活性检测原理测定过程中所需要的仪器和试剂:紫外分光光度计、1mL石英比色皿、研钵/匀浆器、可调式移液器、台式离心机、恒温水浴/培养箱和蒸馏水。
1.粗酶液的制备(可根据预实验结果适当调整样本量)
按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:(5-10)的比例(建议称取0.1g组织,加入1mL提取液)处理样品,冰浴匀浆,4℃g离心10min,取上清即为粗酶液,置于冰上待测。
吸光值测定:测定nm处吸光值,记为A测定和A空白,计算A测定=A测定-A空白。注:空白管只需测定1-2次。
注意事项
为保证结果准确且避免试剂损失,测定前请仔细阅读说明书(以实际收到说明书内容为准),确认试剂储存和准备是否充分,操作步骤是否清楚,且务必取2-3个预期差异较大的样本进行预测定,过程中问题请您及时与工作人员联系。
ForResearchUseOnly.NotforUseinDiagnosticProcedures.